Amidase (AMD)
Enzim:Adalah katalis biologis makromolekul, sebagian besar enzim adalah protein
Amidase:Mengkatalisis hidrolisis berbagai amida alifatik dan aromatik endogen dan asing dengan mentransfer gugus asil ke air dengan produksi asam bebas dan amonia.Asam hidroksamat dan asam organik lainnya banyak digunakan sebagai obat karena merupakan penyusun faktor pertumbuhan, antibiotik, dan penghambat tumor.Amidase dapat dibagi menjadi asilase tipe R dan tipe S menurut stereoselektivitas katalis.
Selain mengkatalisis hidrolisis amida, amidase juga dapat mengkatalisis reaksi transfer asil dengan adanya co-substrat seperti hidroksilamin.
Amidase dengan sumber yang berbeda memiliki spesifisitas substrat yang berbeda, beberapa hanya dapat menghidrolisis amida aromatik, beberapa hanya dapat menghidrolisis amida alifatik, dan beberapa menghidrolisis -atau -amino amida.Sebagian besar amina memiliki aktivitas katalitik yang baik hanya untuk amida aromatik asiklik atau sederhana, tetapi untuk aromatik kompleks, amida heterosiklik, terutama amida dengan substituen orto, umumnya memiliki aktivitas yang rendah (hanya beberapa enzim yang menunjukkan efek katalitik yang lebih baik).
Mekanisme katalitik:
Enzim | Kode Produk | Kode Produk |
bubuk enzim | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | satu set 19 amidases, 50 mg masing-masing 19 item * 50mg / item, atau kuantitas lainnya |
Kit Pemutaran (SynKit) | ES-AMD-1900 | satu set 19 amidases, 1 mg masing-masing 19 item * 1mg / item |
Spesifisitas substrat yang tinggi.
Selektivitas kiral yang kuat.
Efisiensi konversi tinggi.
Lebih sedikit produk sampingan.
Kondisi reaksi ringan.
Ramah lingkungan.
Skrining enzim harus dilakukan untuk substrat tertentu karena spesifisitas substrat, dan mendapatkan enzim yang mengkatalisis substrat target dengan efek katalitik terbaik.
Jangan pernah kontak dengan kondisi ekstrim seperti: suhu tinggi, pH tinggi/rendah dan pelarut organik dengan konsentrasi tinggi.
Biasanya, sistem reaksi harus mencakup substrat, larutan buffer (pH reaksi optimum enzim).Co-substrat seperti hidroksilamin harus ada dalam sistem reaksi transfer asil.
DAL harus ditambahkan terakhir ke dalam sistem reaksi dengan pH dan suhu reaksi yang optimal.
Semua jenis DAL memiliki berbagai kondisi reaksi optimum, sehingga masing-masing harus dipelajari lebih lanjut secara individual.
Contoh 1(1):
Aktivitas hidrolisis ke Substrat Amida yang berbeda
Substrat | Aktivitas tertentu mol min-1mg-1 | Substrat | Aktivitas tertentu mol min-1mg-1 |
asetamida | 3.8 | ο-OH benzamida | 1.4 |
propionamida | 3.9 | p-OH benzamida | 1.2 |
Laktamida | 12.8 | ο-NH2benzamida | 1.0 |
Butiramid | 11.9 | p-NH2benzamida | 0.8 |
isobutiramida | 26.2 | ο-Toluamida | 0,3 |
pentanamida | 22.0 | p-Toluamida | 8.1 |
Heksanamida | 6.4 | nikotinamida | 1.7 |
Sikloheksanamida | 19.5 | Isonicotinamida | 1.8 |
akrilamida | 10.2 | picolinamide | 2.1 |
Metakrilamida | 3.5 | 3-fenilpropionamida | 7.6 |
prolinamida | 3.4 | Indol-3-asetamida | 1.9 |
Benzamida | 6.8 |
Reaksi dilakukan dalam larutan buffer natrium fosfat 50mM, pH 7,5, pada 70 .
amida | Hidroksilamina | Hidrazin |
asetamida | 8.4 | 1.4 |
propionamida | 18.4 | 3.0 |
isobutiramida | 25.0 | 22,7 |
Benzamida | 9.2 | 6.1 |
Reaksi dilakukan dalam larutan buffer natrium fosfat 50mM, pH 7,5, pada 70 .
Konsentrasi reagen terkait: amida, 100 mM(benzamid, 10 mM);hidroksilamin dan hidrazin, 400 mM;enzim 0,9 M.
Contoh 2(2):
Contoh 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., dkk.Extremophiles, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, dkk.Proses Biokimia, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, dkk.Kimia Bioorganik, 2017, Tersedia secara online 7.